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冷冻切片机的操作步骤是什么？一般来讲，步骤主要有以下五步，具体的操作如下，为：

(1)取材。

(2)取出组织支承器，放平摆好组织，周边滴上包埋剂，速放于冷冻台上，冰冻。

(3)将冷冻好的组织块，夹紧于切片机持承器上，启动粗进退键，转动旋钮，将组织修平。

(4)调好欲切的厚度，一般在5—10um间。

(5)调好防卷板。制作冰冻切片，关键在于防卷板的调节上，这就要求操作者要细心，准确地将其调较好，调校至适当的位置。切片时，切出的切片能在时间顺利地通过刀防卷板间的通道，平整地躺在持刀器的铁板上。这时便可掀起防卷板，取一载玻片，将其附贴上即可。

介绍完冷冻切片机的操作步骤，下面我们来谈谈冷冻切片机在操作时的注意事项，总结归纳一下，有以下这些，为：

(1)防卷板及切片刀和持刀架上的板块应保持干净，需经常用毛笔挑除切片残余和用柔软的纸张擦。有时需要每切完一张切片后就用纸擦一次。因为这个地方是切片通过和附贴的地方，如果有残余的包埋剂粘于刀或板上，将会破坏甚至撕裂切片，便切片不能完整切出。

(2)放置组织冰冻前，应视组织的形状及走势来放置，如果胡乱放置，就不能收到很好的效果。

(3)组织块不须经各种固定液固定。

(4)当切片时，如果发现冰冻过度时，可将冰冻的组织连同支承器取出来，在室温停留片刻，再行切片，或者用口中哈气，或者用大拇指按压组织块，以此来软化组织，再行切片。另者，调高冰冻点。

(5)用于附贴切片的载玻片，不能存放于冷冻处，于室温存放即可。因为当附贴切片时，从室温中取出的载玻片与冷冻箱中的切片有一种温度差，当温度较高的载玻片附贴上温度较低的切片时，由于两种物质间温度的差别，当它们碰撞在一起时，分子彼此间发生转移而产生了一种吸附力，使切片与载玻片牢固地附贴在一起。如果使用冷藏的载玻片来附贴切片，由于温度相同，没有发生上述的现象。